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問(wèn)答題
【簡(jiǎn)答題】當(dāng)兩種限制性?xún)?nèi)切核酸酶的作用條件不同時(shí),若要進(jìn)行雙酶切,應(yīng)采取什么措施?為什么?
答案:
注意星活性,先低鹽,后高鹽;先低溫酶,后高溫酶。這樣可以直接在換酶前使第一種酶失活,再加第二種酶,否則易產(chǎn)生星活性?;蚴?..
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【簡(jiǎn)答題】用酚抽提蛋白質(zhì)時(shí),離心后,為什么蛋白質(zhì)總是會(huì)停留在水相和酚相之間?
答案:
酚使蛋白分子間脫水而變性,變性蛋白的密度比水大,但比酚小,因此停在中間。
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問(wèn)答題
【簡(jiǎn)答題】某學(xué)生在用EcoRI切割外源DNA片段時(shí),出現(xiàn)了星號(hào)活性,請(qǐng)分析可能的原因?
答案:
答鹽離子濃度不對(duì),溫度不對(duì),甘油濃度過(guò)高。
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